孔雀石绿检测试剂盒标准液：

标准品溶液（0ppb，0.05ppb，0.1ppb，0.2ppb，0.4ppb，0.8ppb）

取6个1.5ml离心管，把标准品浓缩液用标准品稀释液稀释10倍（如：450ul标准品稀释液加入50ul10×标准品浓缩液）

6.1编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

6.2活化：加120ul活化剂工作液（配液B）到微孔中，室温下反应10min，倒掉拍干，加洗涤工作液（配液A）250ul/孔，洗涤5次，每次间隔30s，弃去孔中液体，在吸水纸上拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的吸头戳破）。

6.3加样反应：加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加抗体工作液50µl/孔，轻轻振荡5秒混匀，37℃避光反应30分钟。

6.4洗涤：将孔内液体甩干，用洗涤液工作液250µl/孔充分洗涤5次，每次间隔30秒，后用吸水纸拍干。

6.5加酶反应：加酶标记物100µl/孔，37℃避光反应30分钟。

6.6洗涤：同上

6.7显色：加底物液A50µl/孔，再加底物液B50µl/孔，轻轻振荡5秒混匀，37℃避光显色15分钟。

6.8终止：每孔加入终止液50µl，轻轻振荡混匀，终止反应。

6.9测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。